Künstliches Bakterienchromosom

Ein künstliches Bakterienchromosom (BAC) ist eine DNA-Konstruktion, die auf einer funktionellen Fruchtbarkeit plasmid (oder F-plasmid) gestützt ist, verwendet, um umzugestalten und in Bakterien, gewöhnlich E. coli zu klonen. F-plasmids spielen eine entscheidende Rolle, weil sie Teilungsgene enthalten, die den gleichen Vertrieb von plasmids nach der Bakterienzellabteilung fördern. Die übliche Einsatz-Größe des künstlichen Bakterienchromosoms ist 150-350 kbp. Ein ähnlicher Klonen-Vektor hat gerufen ein PAC ist auch vom bakteriellen P1-plasmid erzeugt worden.

BACs sind häufig an die Folge das Genom von Organismen in Genom-Projekten, zum Beispiel das Humangenomprojekt gewöhnt. Ein kurzes Stück der DNA des Organismus wird als ein Einsatz in BACs, und dann sequenced verstärkt. Schließlich werden die sequenced Teile in silico umgeordnet, auf die genomic Folge des Organismus hinauslaufend.

Allgemeine Genbestandteile

oriS, repE - F: für die plasmid Erwiderung und Regulierung der Kopie-Zahl.

Absatz und parB: Um F plasmid DNA zu Tochter-Zellen während der Abteilung zu verteilen, und sichert stabile Wartung des BAC.

Ein selectable Anschreiber: für den antibiotischen Widerstand; einige BACs haben auch lacZ an der Klonen-Seite für die blaue/weiße Auswahl.

T7 & Sp6: Phage-Befürworter für die Abschrift von eingefügten Genen.

Beitrag zu Modellen der Krankheit

Geerbte Krankheit

BACs werden jetzt in einem größeren Ausmaß im Modellieren genetischer Krankheiten häufig neben transgenic Mäusen verwertet. BACs sind in diesem Feld nützlich gewesen, weil komplizierte Gene mehrere Durchführungsfolgen stromaufwärts der Verschlüsselungsfolge einschließlich verschiedener Befürworter-Folgen haben können, die ein Ausdruck-Niveau eines Gens regeln werden. BACs sind an etwas Grad des Erfolgs mit Mäusen gewöhnt gewesen, wenn man neurologische Krankheiten wie Alzheimerkrankheit oder als im Fall von mit Unten Syndrom vereinigtem aneuploidy studiert. Es hat auch Beispiele gegeben, als sie verwendet worden sind, um spezifischen mit Krebsen vereinigten oncogenes zu studieren. Sie werden diesen genetischen Krankheitsmodellen durch electroporation/transformation, transfection mit einem passenden Virus oder Mikroeinspritzung übertragen. BACs kann auch verwertet werden, um Gene oder große Folgen von Interesse zu entdecken, und hat dann gepflegt, sie auf das menschliche Chromosom mit der BAC Reihe kartografisch darzustellen. BACs werden für ähnliche genetische Studien bevorzugt, weil sie viel größere Folgen ohne die Gefahr der Neuordnung anpassen, und deshalb stabiler sind als andere Typen, Vektoren zu klonen.

Ansteckende Krankheit

Die Genome von mehreren großen DNA-Viren und RNS-Viren sind als BACs geklont worden. Diese Konstruktionen werden "ansteckende Klone" genannt, weil transfection der BAC-Konstruktion in Gastgeber-Zellen genügend ist, um Vireninfektion zu beginnen. Das ansteckende Eigentum dieser BACs hat die Studie von vielen Viren wie der herpesviruses, poxviruses und coronaviruses zugänglicher gemacht. Molekulare Studien dieser Viren können jetzt mit genetischen Annäherungen erreicht werden, um den BAC zu verändern, während er in Bakterien wohnt. Solche genetischen Annäherungen verlassen sich entweder auf geradlinige oder auf kreisförmige Zielen-Vektoren, um homologe Wiederkombination auszuführen.

Siehe auch

  • Menschliches künstliches Chromosom
  • Hefe künstliches Chromosom
  • Fosmid
  • Cosmid

Links


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