Chromatographie

Chromatographie (von Griechisch  chroma "Farbe" und  graphein, "um" zu schreiben), ist der gesammelte Begriff für eine Reihe von Labortechniken für die Trennung von Mischungen.

Die Mischung wird in einer Flüssigkeit genannt die "bewegliche Phase" aufgelöst, die sie durch eine Struktur trägt, die meint, dass ein anderes Material die "stationäre Phase" genannt hat. Die verschiedenen Bestandteile der Mischung reisen mit verschiedenen Geschwindigkeiten, sie veranlassend, sich zu trennen. Die Trennung basiert auf dem Differenzialverteilen zwischen den beweglichen und stationären Phasen. Feine Unterschiede in einem Teilungskoeffizienten einer Zusammensetzung laufen auf Differenzialretention auf der stationären Phase und so dem Ändern der Trennung hinaus.

Chromatographie kann vorbereitend oder analytisch sein. Der Zweck der Vorbereitungschromatographie ist, die Bestandteile einer Mischung für den fortgeschritteneren Gebrauch zu trennen (und ist so eine Form der Reinigung). Analytische Chromatographie wird normalerweise mit kleineren Beträgen des Materials getan und ist, für die Verhältnisverhältnisse von analytes in einer Mischung zu messen. Die zwei sind nicht gegenseitig exklusiv.

Geschichte

Chromatographie, wörtlich "das Farbenschreiben", wurde zuerst vom russischen Wissenschaftler Michail Tsvet 1900 verwendet. Er hat fortgesetzt, mit der Chromatographie im ersten Jahrzehnt des 20. Jahrhunderts, in erster Linie für die Trennung von Pflanzenpigmenten wie Chlorophyll, Karotine und xanthophylls zu arbeiten. Da diese Bestandteile verschiedene Farben haben (grün, orange, und gelb, beziehungsweise) haben sie der Technik seinen Namen gegeben. Neue Typen der Chromatographie, die während der 1930er Jahre und der 1940er Jahre entwickelt ist, haben die Technik nützlich für viele Trennungsprozesse gemacht.

Chromatographie-Technik hat sich wesentlich infolge der Arbeit von Archer John Porter Martin und Richard Laurence Millington Synge während der 1940er Jahre und der 1950er Jahre entwickelt. Sie haben die Grundsätze und grundlegenden Techniken der Verteilungschromatografie gegründet, und ihre Arbeit hat die schnelle Entwicklung von mehreren chromatographic Methoden gefördert: Papierchromatographie, Gaschromatographie, und was bekannt als hohe Leistungsflüssigchromatographie werden würde. Seitdem ist die Technologie schnell vorwärts gegangen. Forscher haben gefunden, dass die Hauptgrundsätze der Chromatographie von Tsvet auf viele verschiedene Weisen angewandt werden konnten, auf die verschiedenen Varianten der Chromatographie hinauslaufend, die unten beschrieben ist. Fortschritte verbessern ständig die technische Leistung der Chromatographie, die Trennung von immer ähnlicheren Molekülen erlaubend.

Chromatographie-Begriffe

  • Der analyte ist die während der Chromatographie zu trennende Substanz.
  • Analytische Chromatographie wird verwendet, um die Existenz und vielleicht auch die Konzentration von analyte (s) in einer Probe zu bestimmen.
  • Eine verpfändete Phase ist eine stationäre Phase, die covalently ist, der zu den Unterstützungspartikeln oder zur Innenwand der Säulenröhren verpfändet ist.
  • Ein Chromatogramm ist die Sehproduktion des chromatograph. Im Fall von einer optimalen Trennung entsprechen verschiedene Spitzen oder Muster auf dem Chromatogramm verschiedenen Bestandteilen von getrennter Mischung.

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:Plotted auf der X-Achse ist die Aufbewahrungsfrist und geplant auf der Y-Achse ein Signal (zum Beispiel erhalten durch einen spectrophotometer, Massenspektrometer oder eine Vielfalt anderer Entdecker) entsprechend der Antwort, die durch den analytes das Herausnehmen über das System geschaffen ist. Im Fall von einem optimalen System ist das Signal zur Konzentration des spezifischen getrennten analyte proportional.

  • Ein chromatograph ist Ausrüstung, die einer hoch entwickelten Trennung z.B Benzin chromatographic oder flüssige chromatografische Trennung ermöglicht.
  • Chromatographie ist eine physische Methode der Trennung, in der die Bestandteile, getrennt zu werden, unter zwei Phasen verteilt werden, von denen eine stationär ist (stationäre Phase), während sich der andere (die bewegliche Phase) in einer bestimmten Richtung bewegt.
  • Der eluate ist die bewegliche Phase, die Säule verlassend.
  • Der Eluent ist das Lösungsmittel, das den analyte tragen wird.
  • Eine eluotropic Reihe ist eine Liste von gemäß ihrer eluting Macht aufgereihten Lösungsmitteln.
  • Eine unbeweglich gemachte Phase ist eine stationäre Phase, die auf den Unterstützungspartikeln, oder auf der inneren Wand der Säulenröhren unbeweglich gemacht wird.
  • Die bewegliche Phase ist die Phase, die sich in einer bestimmten Richtung bewegt. Es kann eine Flüssigkeit (LC und Haargefäß Electrochromatography (CEC)), ein Benzin (GC) oder eine superkritische Flüssigkeit (superkritisch-flüssige Chromatographie, SFC) sein. Die bewegliche Phase besteht aus der Probe, die sich zu sein, getrennt/analysiert hat und das Lösungsmittel, das die Probe durch die Säule bewegt. Im Fall von HPLC besteht die bewegliche Phase aus einem nichtpolaren Lösungsmittel (N) wie hexane in der normalen Phase oder polare Lösungsmittel in der Rückphase chromotagraphy und der Probe, die wird trennt. Die bewegliche Phase bewegt sich durch die Chromatographie-Säule (die stationäre Phase), wo die Probe mit der stationären Phase aufeinander wirkt und getrennt wird.
  • Vorbereitungschromatographie wird verwendet, um genügend Mengen einer Substanz für den weiteren Gebrauch, aber nicht die Analyse zu reinigen.
  • Die Aufbewahrungsfrist ist die charakteristische Zeit, die man für einen besonderen analyte braucht, um das System (von der kleinen Säulenbucht bis den Entdecker) unter gestellten Bedingungen durchzuführen. Siehe auch: Der Retentionsindex von Kovats
  • Die Probe ist die in der Chromatographie analysierte Sache. Es kann aus einem einzelnen Bestandteil bestehen, oder es kann eine Mischung von Bestandteilen sein. Wenn die Probe im Laufe einer Analyse behandelt wird, werden die Phase oder die Phasen, die das analytes von Interesse enthalten, als die Probe gekennzeichnet, wohingegen alles aus dem Interesse, das von der Probe vorher oder im Laufe der Analyse getrennt ist, Verschwendung genannt wird.
  • Der solute bezieht sich auf die Beispielbestandteile in der Verteilungschromatografie.
  • Das Lösungsmittel verweist auf jede zu solubilizing fähige Substanz eine andere Substanz, und besonders die flüssige bewegliche Phase in der Flüssigchromatographie.
  • Die stationäre Phase ist die Substanz, die im Platz für das Chromatographie-Verfahren befestigt wird. Beispiele schließen die Kieselerde-Schicht in die dünne Schicht-Chromatographie ein

Chromatographie basiert auf dem Konzept des Teilungskoeffizienten. Jeder solute wird zwischen zwei unvermischbaren Lösungsmitteln verteilen. Wenn wir ein Lösungsmittel unbeweglich (durch die Adsorption auf einer festen Unterstützungsmatrix) und ein anderes Mobiltelefon machen, läuft es auf allgemeinste Anwendungen der Chromatographie hinaus. Wenn Matrixunterstützung polar ist (z.B Papier, Kieselerde usw.), ist es Vorwärtsphase-Chromatographie, und wenn es (C-18) nicht polar ist, ist es Rückphase.

Techniken durch die chromatographic Bettgestalt

Säulenchromatographie

Säulenchromatographie ist eine Trennungstechnik, in der das stationäre Bett innerhalb einer Tube ist. Die Partikeln der festen stationären Phase oder der mit einer flüssigen stationären Phase angestrichenen Unterstützung können das ganze Innenvolumen der Tube (gepackte Säule) füllen oder darauf konzentriert werden, oder entlang der Innentube-Wand, einen offenen, uneingeschränkten Pfad für die bewegliche Phase im mittleren Teil der Tube verlassend (öffnen Sie röhrenförmige Säule). Unterschiede in Raten der Bewegung durch das Medium werden zu verschiedenen Aufbewahrungsfristen der Probe berechnet.

1978 hat W. C. Still eine modifizierte Version der Säulenchromatographie genannt Blitz-Säulenchromatographie (Blitz) eingeführt. Die Technik ist der traditionellen Säulenchromatographie sehr ähnlich, abgesehen von der das Lösungsmittel durch die Säule durch die Verwendung positiven Drucks gesteuert wird. Das hat den meisten Trennungen erlaubt, in weniger als 20 Minuten mit verbesserten Trennungen im Vergleich zur alten Methode durchgeführt zu werden. Moderne Blitz-Chromatographie-Systeme werden als vorgepackte Plastikpatronen verkauft, und das Lösungsmittel wird durch die Patrone gepumpt. Systeme können auch mit Entdeckern und Bruchteil-Sammlern verbunden werden, die Automation zur Verfügung stellen. Die Einführung von Anstieg-Pumpen ist auf schnellere Trennungen und weniger lösenden Gebrauch hinausgelaufen.

In der ausgebreiteten Bettadsorption wird ein fluidized Bett, aber nicht eine feste durch ein gepacktes Bett gemachte Phase verwendet. Das erlaubt Weglassung von anfänglichen Abrechnungsschritten wie centrifugation und Filtrieren, für Kulturfleischbrühen oder Schlicker von gebrochenen Zellen.

Chromatographie von Phosphocellulose verwertet die verbindliche Sympathie von vielen DNA BINDENDEN Proteinen für phosphocellulose. Je stärker eine Wechselwirkung eines Proteins mit der DNA, desto höher die Salz-Konzentration, die zu elute dieses Protein erforderlich ist.

Planare Chromatographie

Planare Chromatographie ist eine Trennungstechnik, in der die stationäre Phase als oder auf einem Flugzeug da ist. Das Flugzeug kann eine Zeitung sein, als solch oder gesättigt durch eine Substanz als das stationäre Bett (Papierchromatographie) oder eine Schicht der festen Partikel-Ausbreitung auf einer Unterstützung wie ein Glasteller (dünne Schicht-Chromatographie) dienend. Verschiedene Zusammensetzungen in der Beispielmischung reisen verschiedene Entfernungen gemäß, wie stark sie mit der stationären Phase verglichen mit der beweglichen Phase aufeinander wirken. Der spezifische Retentionsfaktor (R) jeder Chemikalie kann verwendet werden, um in der Identifizierung einer unbekannten Substanz zu helfen.

Papierchromatographie

Papierchromatographie ist eine Technik, die mit dem Stellen eines kleinen Punkts oder Linie der Beispiellösung auf einen Streifen von Chromatographie-Papier verbunden ist. Das Papier wird in ein Glas gelegt, das eine seichte Schicht des Lösungsmittels enthält, und gesiegelt. Als sich das Lösungsmittel durch das Papier erhebt, entspricht es die Beispielmischung, die anfängt, das Papier mit dem Lösungsmittel zu reisen. Dieses Papier wird aus Zellulose, einer polaren Substanz gemacht, und die Zusammensetzungen innerhalb der Mischung reisen weiter, wenn sie nichtpolar sind. Mehr polares Substanz-Band mit dem Zellulose-Papier schneller, und reist deshalb als weit nicht.

Dünne Schicht-Chromatographie

Dünne Schicht-Chromatographie (TLC) ist eine weit verwendete Labortechnik und ist der Papierchromatographie ähnlich. Jedoch, anstatt eine stationäre Phase von Papier zu verwenden, schließt es eine stationäre Phase einer dünnen Schicht von adsorbent wie Kieselgel, Tonerde oder Zellulose auf einem flachen, trägen Substrat ein. Im Vergleich zu Papier ist es im Vorteil schnellerer Läufe, besserer Trennungen und der Wahl zwischen verschiedenem adsorbents. Für die noch bessere Entschlossenheit und Quantifizierung zu berücksichtigen, kann Hochleistungs-TLC verwendet werden.

Versetzungschromatographie

Das Kernprinzip der Versetzungschromatographie ist:

Ein Molekül mit einer hohen Sympathie für die Chromatographie-Matrix (der displacer) wird sich effektiv um verbindliche Seiten bewerben, und so alle Moleküle mit kleineren Sympathien versetzen.

Es gibt verschiedene Unterschiede zwischen Versetzung und elution Chromatographie. In der elution Weise erscheinen Substanzen normalerweise aus einer Säule im schmalen, Spitzen von Gaussian. Die breite Trennung von Spitzen, vorzugsweise zur Grundlinie, wird gewünscht, um maximale Reinigung zu erreichen. Die Geschwindigkeit, mit der jeder Bestandteil einer Mischung unten die Säule in der elution Weise reist, hängt von vielen Faktoren ab. Aber für zwei Substanzen, um mit verschiedenen Geschwindigkeiten zu reisen, und dadurch aufgelöst zu werden, muss es wesentliche Unterschiede in etwas Wechselwirkung zwischen dem biomolecules und der Chromatographie-Matrix geben. Betriebsrahmen werden angepasst, um die Wirkung dieses Unterschieds zu maximieren. In vielen Fällen kann die Grundlinie-Trennung der Spitzen nur mit der Gradientenentwicklung und niedrigen Säule loadings erreicht werden. So sind zwei Nachteile zur elution Weise-Chromatographie, besonders an der Vorbereitungsskala, betriebliche Kompliziertheit, wegen des Anstieg-Lösungsmittel-Pumpens und niedrigen Durchflusses, wegen der niedrigen Säule loadings. Versetzungschromatographie ist im Vorteil gegenüber der elution Chromatographie, in der Bestandteile in Konsekutivzonen von reinen Substanzen aber nicht "Spitzen" aufgelöst werden. Weil der Prozess die Nichtlinearität der Isothermen ausnutzt, kann ein größeres Säulenfutter auf einer gegebenen Säule mit den gereinigten bei bedeutsam höheren Konzentrationen wieder erlangten Bestandteilen getrennt werden.

Techniken durch den physischen Staat der beweglichen Phase

Gaschromatographie

Gaschromatographie (GC), die auch manchmal als Gasflüssigchromatographie, (GLC) bekannt ist, ist eine Trennungstechnik, in der die bewegliche Phase ein Benzin ist. Gaschromatographie wird immer in einer Säule ausgeführt, die normalerweise "gepackt" ist oder "Haargefäß" (sieh unten).

Gaschromatographie (GC) basiert auf einem Teilungsgleichgewicht von analyte zwischen einer festen stationären Phase (häufig ein flüssiges Silikon-basiertes Material) und einem beweglichen Benzin (meistenteils Helium). Die stationäre Phase wird am Inneren einer Glastube des kleinen Diameters (eine kapillare Säule) oder eine feste Matrix innerhalb einer größeren Metalltube (eine gepackte Säule) geklebt. Es wird in der analytischen Chemie weit verwendet; obwohl die hohen in GC verwendeten Temperaturen es unpassend für das hohe Molekulargewicht biopolymers machen oder Proteine (Hitze sie denaturieren wird), oft gestoßen in der Biochemie, wird ihm für den Gebrauch in der petrochemischen Umweltüberwachung und der Wiedervermittlung und den chemischen Industriefeldern gut angepasst. Es wird auch umfassend in der Chemie-Forschung verwendet.

Flüssigchromatographie

Flüssigchromatographie (LC) ist eine Trennungstechnik, in der die bewegliche Phase eine Flüssigkeit ist. Flüssigchromatographie kann entweder in einer Säule oder in einem Flugzeug ausgeführt werden. Gegenwärtige Flüssigchromatographie, die allgemein sehr kleine sich verpacken lassende Partikeln und einen relativ hohen Druck verwertet, wird hohe Leistungsflüssigchromatographie (HPLC) genannt.

In HPLC wird die Probe durch eine Flüssigkeit am Hochdruck (die bewegliche Phase) durch eine Säule gezwungen, die mit einer stationären Phase gepackt ist, die aus unregelmäßig oder Partikeln in der kugelförmigen Form, eine poröse monolithische Schicht oder eine poröse Membran zusammengesetzt ist. HPLC wird in zwei verschiedene auf der Widersprüchlichkeit der beweglichen und stationären Phasen gestützte Unterklassen historisch geteilt. Methoden, in denen die stationäre Phase mehr polar ist als die bewegliche Phase (z.B Toluol als die bewegliche Phase, Kieselerde als die stationäre Phase) sind genannte normale Phase-Flüssigchromatographie (NPLC), und das Gegenteil (z.B Wassermethanol-Mischung als die bewegliche Phase und der C18 = octadecylsilyl als die stationäre Phase) ist genannte umgekehrte Phase-Flüssigchromatographie (RPLC). Ironisch hat die "normale Phase" weniger Anwendungen, und RPLC wird deshalb beträchtlich mehr verwendet.

Spezifische Techniken, die unter diesem breiten Kopfstück kommen, werden unten verzeichnet. Es sollte auch bemerkt werden, dass die folgenden Techniken auch als schnelle Protein-Flüssigchromatographie betrachtet werden können, wenn kein Druck verwendet wird, um die bewegliche Phase durch die stationäre Phase zu steuern. Siehe auch Wässrige Normale Phase-Chromatographie.

Affinitätschromatographie

Affinitätschromatographie basiert auf der auswählenden non-covalent Wechselwirkung zwischen einem analyte und spezifischen Molekülen. Es ist sehr spezifisch, aber nicht sehr robust. Es wird häufig in der Biochemie in der Reinigung von zu Anhängseln gebundenen Proteinen verwendet. Diese Fusionsproteine werden mit Zusammensetzungen wie Seine-Anhängsel, biotin oder Antigene etikettiert, die zur stationären Phase spezifisch binden. Nach der Reinigung werden einige dieser Anhängsel gewöhnlich entfernt, und das reine Protein wird erhalten.

Affinitätschromatographie verwertet häufig eine Sympathie eines biomolecule für ein Metall (Zn, Cu, Fe, usw.). Säulen sind häufig manuell bereit. Traditionelle Sympathie-Säulen werden als ein Vorbereitungsschritt verwendet, unerwünschten biomolecules auszuspülen.

Jedoch bestehen HPLC Techniken, die wirklich Sympathie chromatogaphy Eigenschaften verwerten. Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC) ist nützlich, um oben erwähnte Moleküle zu trennen, die auf der Verhältnissympathie für das Metall (D. h. Dionex IMAC) gestützt sind. Häufig können diese Säulen mit verschiedenen Metallen geladen werden, um eine Säule mit einer ins Visier genommenen Sympathie zu schaffen.

Superkritische flüssige Chromatographie

Superkritische flüssige Chromatographie ist eine Trennungstechnik, in der die bewegliche Phase eine Flüssigkeit oben und relativ in der Nähe von seiner kritischen Temperatur und Druck ist.

Techniken durch den Trennungsmechanismus

Ion-Austauschchromatographie

Ion-Austauschchromatographie (gewöhnlich gekennzeichnet als Ion-Chromatographie) verwendet einen Ion-Austauschmechanismus, auf ihren jeweiligen Anklagen gestützten analytes zu trennen. Es wird gewöhnlich in Säulen durchgeführt, aber kann auch in der planaren Weise nützlich sein. Ion-Austauschchromatographie verwendet eine beladene stationäre Phase, um beladene Zusammensetzungen einschließlich Anionen, cations, Aminosäuren, peptides, und Proteine zu trennen. In herkömmlichen Methoden ist die stationäre Phase ein Ion-Austauschharz, das beladene funktionelle Gruppen trägt, die mit entgegengesetzt beladenen Gruppen der zu behaltenden Zusammensetzung aufeinander wirken. Ion-Austauschchromatographie wird allgemein verwendet, um Proteine mit FPLC zu reinigen.

Chromatographie des Größe-Ausschlusses

Chromatographie des Größe-Ausschlusses (SEC) ist auch bekannt als Gel-Durchdringungschromatographie (GPC) oder Gel-Filtrieren-Chromatographie und trennt Moleküle gemäß ihrer Größe (oder genauer gemäß ihrem hydrodynamischen Diameter oder hydrodynamischem Volumen).

Kleinere Moleküle sind im Stande, in die Poren der Medien und deshalb einzugehen, Moleküle werden gefangen und vom Fluss der beweglichen Phase entfernt. Die durchschnittliche Verweilzeit in den Poren hängt von der wirksamen Größe der analyte Moleküle ab. Jedoch werden Moleküle, die größer sind als die durchschnittliche Porengröße der Verpackung, ausgeschlossen und ertragen so im Wesentlichen keine Retention; solche Arten sind erst, um eluted zu sein. Es ist allgemein eine Chromatographie-Technik der niedrigen Entschlossenheit, und so wird es häufig für den endgültigen, "glänzend werdenden" Schritt einer Reinigung vorbestellt. Es ist auch nützlich, für die tertiäre Struktur und Vierergruppe-Struktur von gereinigten Proteinen besonders zu bestimmen, da es unter heimischen Lösungsbedingungen ausgeführt werden kann.

Spezielle Techniken

Umgekehrte phasige Chromatographie

Umgekehrte phasige Chromatographie ist ein elution Verfahren, das in der Flüssigchromatographie verwendet ist, in der die bewegliche Phase bedeutsam mehr polar ist als die stationäre Phase.

Zweidimensionale Chromatographie

In einigen Fällen kann die Chemie innerhalb einer gegebenen Säule ungenügend sein, um einen analytes zu trennen. Es ist möglich, eine Reihe von ungelösten Spitzen auf eine zweite Säule mit dem verschiedenen physikochemisch (Chemische Klassifikation) Eigenschaften zu leiten. Da der Mechanismus der Retention auf dieser neuen festen Unterstützung von der ersten dimensionalen Trennung verschieden ist, kann es möglich sein, Zusammensetzungen zu trennen, die durch die eindimensionale Chromatographie nicht zu unterscheidend sind.

Die Probe wird an einer Ecke eines Quadrattellers entdeckt, hat luftausgetrocknet, dann rotieren gelassen durch 90 ° entwickelt und hat gewöhnlich in einem zweiten lösenden System neu entwickelt.

Vorgetäuschte Chromatographie des bewegenden Betts

Gaschromatographie von Pyrolysis

Gaschromatographie-Massenspektrometrie von Pyrolysis ist eine Methode der chemischen Analyse, in der die Probe zur Zergliederung geheizt wird, um kleinere Moleküle zu erzeugen, die durch die Gaschromatographie getrennt werden und verwendende Massenspektrometrie entdeckt haben.

Pyrolysis ist die Thermalzergliederung von Materialien in einer trägen Atmosphäre oder einem Vakuum. Die Probe wird in den direkten Kontakt mit einer Platin-Leitung gestellt, oder in eine Quarzbeispieltube gelegt, und schnell zu 600-1000 °C geheizt. Abhängig von der Anwendung werden noch höhere Temperaturen verwendet. Drei verschiedene Heizungstechniken werden in wirklichem pyrolyzers verwendet: Isothermischer Brennofen, induktive Heizung (Curie-Punkt-Glühfaden) und widerspenstige Heizung mit Platin-Glühfäden. Große Moleküle kleben an ihren schwächsten Punkten und erzeugen kleinere, flüchtigere Bruchstücke. Diese Bruchstücke können durch die Gaschromatographie getrennt werden. Pyrolysis GC Chromatogramme sind normalerweise kompliziert, weil eine breite Reihe von verschiedenen Zergliederungsprodukten gebildet wird. Die Daten können entweder als Fingerabdruck verwendet werden, um zu beweisen, dass materielle Identität oder die GC/MS Daten verwendet werden, um individuelle Bruchstücke zu identifizieren, um Strukturinformation zu erhalten. Um die Flüchtigkeit von polaren Bruchstücken zu vergrößern, können verschiedene methylating Reagenzien zu einer Probe vorher pyrolysis hinzugefügt werden.

Außer dem Gebrauch von hingebungsvollem pyrolyzers, pyrolysis GC fester und flüssiger Proben kann direkt innerhalb von Injektoren von Programmable Temperature Vaporizer (PTV) durchgeführt werden, die schnelle Heizung (bis zu 30 °C/s) und hohe maximale Temperaturen von 600-650 °C zur Verfügung stellen. Das ist für einige pyrolysis Anwendungen genügend. Der Hauptvorteil besteht darin, dass kein hingebungsvolles Instrument gekauft werden muss und pyrolysis als ein Teil der GC alltäglichen Analyse durchgeführt werden kann. In diesem Fall muss Quarz GC hat Überseedampfer angesogen, verwendet werden. Quantitative Daten können erworben werden, und gute Ergebnisse der Derivatisierung innerhalb des PTV Injektors werden ebenso veröffentlicht.

Schnelle Protein-Flüssigchromatographie

Schnelle Protein-Flüssigchromatographie (FPLC) ist ein Begriff, der auf mehrere Chromatographie-Techniken angewandt ist, die verwendet werden, um Proteine zu reinigen. Viele dieser Techniken sind zu denjenigen identisch, die unter der hohen Leistungsflüssigchromatographie ausgeführt sind, jedoch ist der Gebrauch von FPLC Techniken normalerweise, um in großem Umfang Gruppen eines gereinigten Produktes vorzubereiten.

Gegenaktuelle Chromatographie

Gegenaktuelle Chromatographie (CCC) ist ein Typ der flüssigen Flüssigchromatographie, wo sowohl die stationären als auch beweglichen Phasen Flüssigkeiten sind.

Der Betriebsgrundsatz der CCC Ausrüstung verlangt eine Säule, die aus einer offenen um eine Spule aufgerollten Tube besteht. Die Spule wird in einer doppelten Achse kreisende Bewegung rotieren gelassen (eine Herzkurve), der einen variablen Ernst (G) Feld veranlasst, der Säule während jeder Folge zu folgen. Diese Bewegung veranlasst die Säule, eine zu sehen, Schritt pro Revolution und Bestandteile der Probe verteilen, die in der Säule wegen ihres Verteilen-Koeffizienten zwischen den zwei unvermischbaren flüssigen verwendeten Phasen getrennt ist. Es gibt viele Typen von CCC verfügbar heute. Diese schließen HSCCC (Hohe Geschwindigkeit CCC) und HPCCC (Hohe Leistung CCC) ein. HPCCC ist die letzte und beste leistende Version der Instrumentierung verfügbar zurzeit.

Chromatographie von Chiral

Chromatographie von Chiral schließt die Trennung von stereoisomers ein. Im Fall von enantiomers haben diese keine chemischen oder physischen Unterschiede abgesondert davon, dreidimensionale Spiegelimages zu sein. Herkömmliche Chromatographie oder andere Trennungsprozesse sind des Trennens von ihnen unfähig. Um chiral Trennungen zu ermöglichen, stattzufinden, müssen entweder die bewegliche Phase oder die stationäre Phase selbst chiral gemacht werden, sich unterscheidende Sympathien zwischen dem analytes gebend. Chromatographie von Chiral HPLC Säulen (mit einer chiral stationären Phase) sowohl in der normalen als auch in umgekehrten Phase ist gewerblich verfügbar.

Siehe auch

  • Wässrige normal-phasige Chromatographie
  • Mehrsäulengegenstrom lösende Anstieg-Reinigung (MCSGP)
  • Gleichung von Purnell
  • Chromatographie im Blut, das in einer Prozession geht
  • Chromatographie-Software
  • Gleichung von Van Deemter
  • Verbindliche Selektivität

Links


Verwandt / Clement Martyn Doke
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