Rückabschrift polymerase Kettenreaktion (RT-PCR) ist eine Variante der Polymerase-Kettenreaktion (PCR). Es ist eine in der molekularen Biologie allgemein verwendete Labortechnik, wo ein RNS-Ufer abgeschrieben in seine DNA-Ergänzung Rück-ist (Ergänzungs-DNA oder cDNA), kehrt das Verwenden des Enzyms transcriptase um, und der resultierende cDNA wird mit PCR verstärkt. Rückabschrift-PCR soll mit der polymerase Echtzeitkettenreaktion (Q-PCR/qRT-PCR) nicht verwirrt sein, der auch manchmal als RT-PCR abgekürzt wird.

Gebrauch

Die Exponentialerweiterung über die Rückabschrift polymerase Kettenreaktion sorgt für eine hoch empfindliche Technik, in der eine sehr niedrige Kopie-Zahl von RNS-Molekülen entdeckt werden kann. RT-PCR wird in der Diagnose von genetischen Krankheiten und, halbquantitativ, im Entschluss vom Überfluss an spezifischen verschiedenen RNS-Molekülen innerhalb einer Zelle oder Gewebes als ein Maß des Genausdrucks weit verwendet. Nördliche Klecks-Analyse wird verwendet, um den Genausdruck der RNS weiter zu studieren. RT-PCR kann auch in der Einfügung von eukaryotic Genen in prokaryotes sehr nützlich sein. Weil die meisten eukaryotic Gene introns enthalten, die im Genom, aber nicht im reifen mRNA da sind, ist der von einer RT-PCR Reaktion erzeugte cDNA das genaue (ohne Rücksicht auf den Fehler anfällige Natur der Rückseite transcriptases) DNA-Folge, die ins Protein nach der Abschrift direkt übersetzt würde. Wenn diese Gene in prokaryotic Zellen wegen der Protein-Produktion oder Reinigung ausgedrückt werden, braucht die RNS erzeugt direkt von der Abschrift nicht das Verstärken zu erleben, weil die Abschrift nur exons enthält. (Prokaryotes, wie E. coli, haben am mRNA das Verstärken des Mechanismus von eukaryotes Mangel).

RT-PCR wird im Studieren der Genome von Viren allgemein verwendet, deren Genome aus der RNS, wie Influenzavirus A und retroviruses wie HIV zusammengesetzt werden.

Außenverbindungen

• RT-PCR Protokolle von der staatlichen Universität von Penn
• Datenbank von gültig gemachten PCR Zündvorrichtungssätzen (Website-Kritik)
• Zeichentrickfilm, um RT-PCR Verfahren, vom Kalten Frühlingshafen-Laboratorium zu illustrieren